HMEC-1人微血管内皮传代细胞系

  • 发布时间:2017-03-22 12:36:05,加入时间:2017年03月17日(距今3024天)
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细胞货号: C0546

细胞缩写: HMEC-1细胞

┈技┈术(订购)┈热┈线:0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7)┈联┈系┈Q┈Q:3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0;公司已合作单位有广西医科大学、中山大学附属肿瘤医院、复旦大学、南方医科大学、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、深圳市孙逸仙心血管医院、福建省立医院、上海宠乐道宠物医院、中国科学院上海高等研究院、北京市昌平区中西医结合医院、中国医学科学院肿瘤医院、云南中医学院、绍兴市人民医院、汕头大学医学院、首都医科大学附属北京同仁医院、解放军总医院、上海瑞金医院、北京宣武医院、吉林大学第一临床医院、北京中医药大学附属东直门医院、北京天坛医院、复旦大学附属肿瘤医院、北京协和医院、河北医科大学第二医院、上海市中医医院、复旦大学附属儿科医院、浙江省中医院、上海华山医院、哈尔滨医科大学附属第一医院、西安唐都医院、上海长征医院、广州珠江医院、上海仁济医院、山西省眼科医院、航天中心医院、中山大学肿瘤医院、重庆新桥医院、浙江大学附属第二医院、解放军总医院(301医院)、北京大学第三医院、北京大学人民医院、山西医科大学第二医院、、广州中医药大学第一附属医院、宁波市第二医院、广州南方医院、西京医院、复旦大学附属中山医院、浙江大学医学院附属第一医院、重庆医科大学第二医院、北京地坛医院、北京大学第一医院、中山大学附属第一医院、天津市肿瘤医院、武汉协和医院心血管疾病研究所、第二军医大学东方肝胆外科医院、北京肿瘤医院、湖南省肿瘤医院、南方医院、广东省人民医院、北京市广安门医院、北京同仁医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、上海仁济医院(西部)、山东大学齐鲁医院、海军总医院;细胞名称: HMEC-1(人微血管内皮细胞)

T25培养瓶发货形式是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。背景资料: 见细胞说明书

细胞消化时注意把握消化时间,消化不够会导致吹打细胞时造成损伤,一般消化时间是2-3分钟,但以镜检时大部分细胞缩回球形为准,一般2次即可将细胞吹打下来,消化不够进行细胞吹打易损伤细胞。细胞系的冻存液配方:90%FBS+10%DMSO,贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

公司提供的细胞代次低,活性好,质量有保障,全程为您的细胞相关科研实验研究保驾护航,技术一对一服务,细胞培养过程一条龙服务,代次: P4

规格: 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)

细胞数: 1*10(6)

离心管发货形式是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75 培养瓶,加入10-15ml培养基,,建议10ml培养基,也可以使用T175 培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,一般不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。生物安全级别: 1

生物体:

组织来源: 皮肤

细胞形态: 上皮细胞样

"T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。

部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。细胞特性:" 贴壁

特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养,贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养,如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion),冻存液中含有DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较的浓度。细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即取0.2-0.3ml的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果。冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一。

细胞检测: 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件: 选择此细胞合适的培养基(DMEM低糖、DMEM高糖、RPMI-1640、McCoy's 5A等培养基)89%和10%PBS及1%双抗(防止污染)或者此细胞的完全培养基或者此细胞的专用培养基;生长条件:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃(模拟人体正常温度培养,这也是体外培养合适的温度)

传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代。传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。细胞状态不好或者生长极慢的时候,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。请不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化(让它们慢慢适应)。传代方法: 建议1:2-1:3 两天换液一次;公司提供部分ATCC细胞有(限于页面篇幅,公司全部细胞并未展示,如有具体所需细胞,请咨询我们哦);CRL-1459|CCD-18Co细胞;CRL-2797|MOVAS细胞;

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