1 原理及用途
试剂盒采用间接竞争ELISA(酶联免疫)方法检测测样本中的孔雀石绿。( MalachiteGreen oxalate ,MG),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的孔雀石绿和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗孔雀石绿抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含孔雀石绿含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中孔雀石绿的残留量。
2 技术指标
2.1 试剂盒灵敏度:0.025ppb(ng/ml)
2.2 反应模式:25℃, 30min~30min~15min
2.3 检测下限:
鱼/虾…………………………0.1ppb
2.4 交叉反应率:
2.5 样本回收率:
鱼/虾等水产品、水样……………85%±15%
3 孔雀石绿检测试剂盒组成
酶标板………………………………96孔
高浓度标准品溶液1瓶(1ml/瓶):10ppb(高标准液有挥发性,需注意密封)
标准品溶液0ppb、0.025ppb、0.05ppb、0.1ppb、0.2ppb、0.4ppb(均为空瓶子,现配现用)。
酶标记物(红盖)…………………11ml
抗体工作液(蓝盖)………………5.5ml
底物液A(白盖)……………………6ml
底物液B(黑盖)……………………6ml
终止液(黄盖)………………………6ml
助溶剂(黄盖)………………………6ml
氧化剂(黑盖)………………………6ml
10X复溶液(黄盖)…………………20ml
20X浓缩洗涤液(白盖)……………40ml
说明书………………………………1份
4 需要的器材
4.1 仪器:酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)、恒温箱
4.2 微量移液器:单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道300µl
5 注意事项
5.1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温(25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
5.2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
5.3 混合要均匀,洗板要彻底,在ELISA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性。
5.4 在所有孵育过程中,用盖板膜封住微孔板,避免光线照射。
5.5 不要使用过了有效期的试剂盒,不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
5.6 显色液若有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位(A450nm< 0.5 )时,表示试剂可能变质。
5.7 反应终止液有腐蚀性,避免接触皮肤。
6 贮藏及保存期
储藏条件:试剂盒于2-8℃保存,避免冷冻。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。