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常规的香菇三级制种方法，从一级种扩大成栽培种需 80～ 90天，周期长，程序繁琐。我们用杂木屑为主要原料的培养基进行香菇组织培养， 30～ 40天菌丝体长满瓶后，作为菌种用于栽培，结果菌袋出菇齐，转潮快，生物转化率 90％以上，证明具有与优良菌种一样的特性。这种香菇制种方法，简化了程序，缩短了时间，降低了成本。
培养基配方 杂木屑 80％，麸皮 15％，玉米粉 3％，石膏粉 1％，蔗糖 1％（均按干料百分比计算）。 拌料 按配方称量各种原料，按干料的 110％～ 120％准备干净水（井水或自来水）。先将糖溶化在水中，其它原料在水泥地上混合均匀，加水拌料，料的含水量控制在 60％（可用手抓一把料捏成团，手指缝间有水迹而不流水为度）。然后让料堆放 0.5～ 1小时，准备装瓶或装袋。
装瓶或装袋 用 750毫升的菌种瓶或 500毫升的罐头瓶，装料要松紧适宜，松不能有蜂窝眼，紧不可有层叠印。装料至瓶肩处整平，用尖头捣木棒在中间打 1个接种穴，穴深至料面下 2/3处，瓶口用布擦抹干净，如果用塑料袋装料制菌种，需选用聚丙烯耐高温袋，将袋口加颈圈（可用打包带焊接成直径 3～ 4厘米的圈制成），外卷袋口塞到颈圈下缘内，形成瓶口状，加盖棉塞，装料和打接种穴与瓶装相同。
灭菌 将菌种瓶或袋排放在高压灭菌锅内拧紧锅盖，打开锅盖上的放气阀门，加热至放气阀冲出直气流（有烫手感），证明锅内冷气已被排尽，然后关闭放气阀使压力表读数上升。当压力表读数为 0.1毫帕时开始计时，让压力在 0.1～ 0.15毫帕维持 1.5～ 2小时，停止加热，待压力降为零时取出菌种瓶或袋。 如果没有高压灭菌锅可用常压灭菌锅灭菌。采用常压灭菌时，在 100℃的温度下，需连续蒸 8～ 12小时，停火后再焖蒸 3～ 4小时。
接种 选择优良菇体作菌种 因为此制种技术需要从鲜菇体上切取组织块接种。因此，所用香菇体要大小适中（菌盖直径约 4～ 6厘米）、无虫害、无杂菌，菌盖圆正肥厚，表面有花纹（浸水或被雨水淋过的菇体不能选用）培养管理 将接种过的菌种瓶或袋放在恒温培养箱内，培养温度控制在 25℃。如果没有恒温培养箱，可放在培养室内培养，保持室内空气干燥新鲜，避光培养，温度调节在 25℃， 30～ 40天菌丝即可长满瓶或袋，无杂菌污染的菌丝体，即可用作菌种。可以用菌菇生态宝稀释水喷洒，促进菌丝生长，预防病菌。在培养期间注意检查杂菌污染和菌丝生长情况。一般接种后培养 7～ 10天可检查杂菌，正常的香菇菌丝为白色，含杂菌的带有红、黄、青、绿、黑等颜色。发现杂菌，少量的可连同培养料挖出，再用 5％石灰水擦去残余杂菌；污染严重的要及时处理掉，防止在培养室内传播。
