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操作步骤
试管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊红细胞: 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素混匀,置 37℃水浴 30min。
2、稀释血清:待测血清 0.2ml,加应用液 3.8ml,稀释度为 1:20。
3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水,混匀。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置 37℃水浴 30min, 第 10 管为非溶血对照:补体 CH50 测定试管法
5、结果测定:取出试管, 2000r/min 离心 10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与 50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,
确定与标准管接近者为终点管,然后按下公式计算 CH50 值:
血清补体 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀释度。
如第 5 管为终点管,测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。
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