染料法丝状支原体丝状亚种实时定量PCR试剂盒
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides SC
货号:Mqs-msc-20 规格:20个反应
货号:Mqs-msc-50 规格:50个反应
货号:Mqs-msc-100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
-
特异性检测丝状支原体丝状亚种,与其他生物基因组没有交叉反应。
灵敏度高,检测极限相当于7-13个CFU/反应。
采用热启动DNA聚合酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。
带有ROX参比染料,帮助校正加样误差和管间差异。
带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
丝状支原体丝状亚种小克隆(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC,简称MmmSC)是丝状支原体族的一员。由于丝状支原体丝状亚种大克隆(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides LC,简称MmmLC)已被重新归类为丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp. capricolum),因此,丝状支原体丝状亚种(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides,简称Mmm)仅剩MmmSC。
MmmSC于1898年首次发现,是牛传染性胸膜肺炎(CBPP,一种严重的呼吸道传染病)的致病菌,表现为血清纤维蛋白化、间质性肺炎和肺部骨坏死,是养牛业的主要威胁,在流行区域可造成很大的经济损失。受限于缺乏小型动物的疾病模型,其致病机制仍不清楚,其细胞表面的多糖抗原可能是致病因素。欧洲菌株在发病率和致死率上低于非洲菌株,可能与其释放过氧化氢较少有关。在疾病流行的初期,以急性和亚急性发病为主,随后转向慢性发展。
MmmSC体外培养较为容易,使用液体或固体琼脂培养基,根据底物利用度、生长抑制和免疫荧光等进行生化和血清学鉴定。补体结合实验是目前的主要鉴定方法,适合在疾病急性发展阶段进行检测,但不太适合在疾病早期和慢性发展阶段的检测,而且操作复杂,耗时且昂贵,很难精确且连续的获取可靠的结果。凝集测定实验比较快速,但是灵敏度和特异性较低。免疫印迹和ELISA方法则容易出现交叉反应,且操作复杂,耗时较长。PCR是最快速和最有效的方法,有更高的灵敏度和更强的特异性,仅需几个小时即可获得结果。定量PCR法与普通PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。
由于其他的PCR方法多选择一些变异很少的靶点区域,本试剂盒通过将MmmSC与亲缘关系最近的MmmLC的基因组进行比较,选取一段变异较多的区域作为靶点,特异性识别MmmSC,经BLAST验证,与其他生物基因组没有交叉反应。本试剂盒检测了分布范围或亲缘关系较近的8种支原体共36个菌株,未发现非特异信号。
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