F81FK81细胞猫肾细胞提供STR

  • 发布时间:2021-07-28 14:14:37,加入时间:2021年07月07日(距今995天)
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一、细胞基本属性

细胞名称 猫肾细胞

细胞别称 F81; FK81

细胞货号 SNL-007

细胞种属 猫

生长情况 贴壁

培养条件 1640+10%FBS+1%双抗

培养环境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、细胞培养操作

换液周期 2-3天

培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);

冻存规格 200-300万/ml,1ml每管

冻存方法 1. 离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3. 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

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