NCI-H1688 人经典小细胞肺癌细胞

  • 发布时间:2022-05-06 11:28:46,加入时间:2021年07月21日(距今982天)
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  一.细胞简介:

  细胞名称:NCI-H1688人经典小细胞肺癌细胞

  平台编号:zl-056724

  该细胞较难培养,细胞订购需提前两周。该细胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶;左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比,该细胞c-mycDNA序列扩增约20倍,RNA增加15倍。最初传代培养基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10nM氢化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml转铁

  细胞特性

  1)来源:肺;癌;经典小细胞肺癌

  2)形态:上皮细胞样贴壁生长

  3)含量:>1x106细胞数

  4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

  5)用途:仅供科研使用。

  运输和保存

  干冰运输及复苏好存活细胞

  (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

  (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

  细胞接收后的处理

  1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

  2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为时收到时细胞状态的依据。

  3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

  4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。

  一.培养基及培养冻存条件准备:

  1)准备1640培养基;优质胎牛血清,20%;双抗,1%。

  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

  二.细胞处理:

  1)冻存细胞的复苏:

  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

  1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

  3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

  3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

  智立中特(武汉)生物科技有限公司是一家集生物研发,生产,销售,为一体的高新技术产业公司。拥有载体质粒,载体,国内外微生物菌种资源,感受态细胞,培养基,细胞株等广泛的生产销售线。

  质粒载体产品:

  提供各种类型载体宿主,基因种属类型,抗性,设计并构建质粒:大肠杆菌表达载体;哺乳动物表达载体;酵母表达载体;昆虫表达载体;植物表达载体;广;腺病毒载体...常用有pACYC184;pACYCDuet-1;pASK-IBA5plus+FUS(人基因);pAX01;pBABE-Puro;pBAD24

  pBI121;pBIFC-bFosVC155;pBIFC-VC15;pCDFDuet-1;pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro;pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro;pBIFC-VN155(I152L)addgene27097;pCDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP-T2A-Puro;pCAGGS;pBiFC-VN173(Plasmid#22010);pBlueScriptSK(+);pBlueScriptIISK(+);pBV220;pCas;pCas9

  pBR322;pBT3-STE;pBudCE4.1以及结合转移质粒RP4;pGL4.25[luc2CP/minP];pGR106;pIRES2-AcGFP1-Nuc;psfGFP;pHEN1;pNL1.1[Nluc];pBBR1-GFP;pBMTB-5;pBMTB-4;pBMTB-3;pBMTB-2;pCAMBIA0305.1;pCX-DR;;pGreenII0800-miRNA;pK7GWIWG2(I);pRARE;pDG1663

  质粒菌种产品:

  E.coliNissle1917;USA300:大肠杆菌JM108;希瓦氏菌属MR-1;E.coliW3110野生型;酿酒酵母W303a;酿酒酵母invsc1;酿酒酵母BY4741;酿酒酵母BY4742;毕赤酵母SMD1168H;PseudomonasputidaKT2440;E.coliMC1061;枯草芽孢杆菌WB800;根癌农杆菌EHA105;根癌农杆菌GV3101;CEN.PK2-1D;CEN.PK2-1C;全耐药鲍曼不动杆菌;哈维弧菌BB170

  菌种产品:

  提供模式菌种,科研菌种,普通菌种等菌种资源,有证质控样品等微生物标准品,芽孢悬液。常用药典菌种如:大肠埃希氏菌CMCC(B)44102、黑曲霉CMCC(F)98003,白色念珠菌CMCC(F)98001,枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501,铜绿假单胞菌CMCC(B)10104,生孢梭菌CMCC(B)64941;常用益生菌:长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum),嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus),鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus),类干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei),干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei);常用真菌:松口蘑Tricholomamatsutake,灰葡萄孢bio-81601cfcc50437Botrytiscinerea;灵芝,香菇,茯苓等

  原代细胞和细胞系产品:

  现取不同组织现分:不同来源人/鼠/兔/猪等不同组织如肺、气管、支气管、甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺、肾、膀胱、输尿管、前列腺、心脏、血管。常用原代细胞有:气管上皮细胞;前列腺上皮细胞;膀胱上皮细胞;输尿管上皮细胞;肾足细胞;内皮祖细胞;输卵管上皮细胞;乳腺上皮细胞

  公司提供细胞系人源做过STR鉴定,其他做过种属鉴定,确保产品无误后方可提供客户,形式冻存或复苏节省客户时间;确保实验顺利。常用细胞系有:WB-F344细胞;RG2[D74]细胞;NRK细胞;A7r5细胞;L6细胞;UMNSAH/DF-1细胞;MDBK(NBL-1)细胞;MDBK细胞;CCC-SMC-1细胞;PtK1(NBL-3)细胞;Mv1Lu细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)细胞;F81细胞;CRFK细胞;MLTC-1细胞;MS1细胞;C3H/10T1/2,Clone8细胞;GL261细胞;P3X63Ag8.653细胞;HCC38细胞;ZR-75-30细胞;SK-LU-1细胞;NCI-H2087细胞;SK-N-MC细胞;Hs895.T细胞

  

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