药用-牛黄 本品细粉约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加20%氢氧化钠溶液10ml，加热回流2小时，冷却，加稀盐酸19ml调节pH至酸性，用醋酸乙酯提取4次（25ml、25ml、20ml、20ml），每次醋酸乙酯液均通过同一铺有少量无水硫酸钠的脱脂棉滤过，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取在105℃干燥至恒重的胆酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.48mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，精密吸取供试品溶液2μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷-醋酸丁酯-冰醋酸-甲酸（8：4：2：1）为展开剂，展至14～17cm，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法（附录ⅥB薄层扫描法）进行扫描，波长：λ<[S]>=380nm，λ<[R]>=650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
本品按干燥品计算，含胆酸（C24H40O5）不得少于4.0%。
胆红素 对照品溶液的制备 取胆红素对照品约10mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿
中药材-牛黄 溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得（每1ml中含胆红素0.01mg）。标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，置具塞试管中，分别加乙醇至9ml，各精密加重氮化溶液（甲液：取对氨基苯磺酸0.1g，加盐酸1.5ml与水适量使成100ml；乙液：取亚硝酸钠0.5g，加水使溶解成100ml，置冰箱内保存。用时取甲液10ml与乙液0.3ml，混匀）1ml，摇匀，于15～20℃暗处放置1小时，以相应的试剂为空白，照分光光度法（附录ⅤB），在533nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法取本品细粉约10mg，精密称定，置锥形瓶中，加氯仿和乙醇
天然牛黄 （7：3）的混合溶液60ml、盐酸1滴，摇匀，置水浴上加热回流约30分钟，放冷，移至100ml棕色量瓶中。容器用少量混合溶液洗涤，并入量瓶中，加上述混合溶液至刻度，摇匀。精密量取上清液10ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取3ml，置具塞试管中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加乙醇至9ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中胆红素的重量（mg），计算，即得。
本品按干燥品计算，含胆红素（C33H36N4O6）不得少于35.0%。
1． 取本品少量，加清水调和，涂于指甲上，能将指甲染成黄色，习称“挂甲”．
2． 取本品少许置试管中，分别加下列试剂3ml，微热，有显色反应：加冰醋酸显绿色，冷后小心滴加等容积的硫酸，下层无色，上层绿色，两层相接处显红色环．（检查甾醇类反应）加硫酸显绿色；加硝酸显红色；加氨水显黄褐色．（检查胆红素）
3． 取粉末0.2g，加盐酸1ml，再加乙醚20ml振摇提取，放置，分取乙醚液，滤过，置分液漏斗中，加氢氧化钡饱和溶液20ml，振摇，即发生黄色沉淀．分离除去水层及沉淀，醚层用氢氧化钡饱和溶液洗涤2次，每次10ml．分取醚层，滤过，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，加醋酐1ml与硫酸2滴，振摇，放置10分钟，即显绿色．（检查结合型胆红素）
4． 取粉末少量，加氯仿1ml摇匀，加硫酸与30%过氧化氢溶液各2滴，振摇，即显红色．（检查胆红素）
5． 取粉末0.1g，加60%醋酸4ml，研磨，滤过，取滤液1ml，加新制的1%糖醛（新蒸馏至近无色）溶液1ml与硫酸溶液（取硫酸50ml，加水65ml，混合）10ml，置70℃水浴中加热10分钟，即显蓝紫色．（检查胆酸）
6． 取本品乙醇提取液作供试液，以胆酸、去氧胆酸乙醇液为对照液．两溶液点于同一硅胶G薄层板上，用氯仿-乙醚=冰醋酸（2∶2∶1）展开，喷10%磷铝酸乙醇溶液，105℃烘10分钟显色，样品液色谱在与对照品色谱相应位置上，显相同的蓝色斑点．
7． 取粉末10mg，加氯仿20ml超声波处理30分钟滤过蒸干滤液，残渣加乙醇lml使溶解作为供试品溶液．另取胆酸与去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml中各合2mg的混合液，作为对照液．吸取上述两溶液各2μl，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷一醋酸乙酯一冰醋酸（15：7：5）为展开剂，展开，取出晾干后，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，置紫外光灯（365nm）下检视．供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点．成分分析研究进展：略
