标本要求 1. 血清： 室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右转/分）。仔细收集上清。保 存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 2. 血浆： 应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。 3.尿液： 用无菌管收集。离心20 分钟左右转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀 形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。 4.细胞培养上清： 检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右转/分）。仔细收集上清。 5.培养细胞: 检测细胞内的成份时，用PBS（PH稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。 通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左 右转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 6.组织标本: 切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化 后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀 浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检 测，其余冷冻备用。 7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进 行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 3. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 4. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 5. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 6. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 7. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 公司秉承价格低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。 操作步骤 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。 4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
