蛋白酶K
中文名 蛋白酶k
定 义 一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶
作 用 生物样品中蛋白质的一般降解
解 释 丝氨酸蛋白酶
保存条件:-20℃保存。
产品说明:蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶,可以切割脂肪族氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸羧基端连接的酯键和肽键。分子量大小为28.9 kDa(单体)。该酶属丝氨酸类蛋白酶,其水解的最小多肽是四肽分子。
产品特点:即用型溶液。在多种反应条件下均有活性
产品用途:基因组DNA的制备。失活RNase、DNase以及反应中的其他酶类。
质量控制:相关检测表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、蛋白酶污染。
活性单位定义:
酶活力,>30U/mg。在37℃,以血红蛋白为底物,1分钟内可以产生相当于1微摩尔酪氨酸Folin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,定义为一个单位蛋白酶K酶活力。
酶活分析混合物:0.08 M磷酸钾(pH 5.0),5 M尿素,4 mM氯化钠,3 mM氯化钙和16.7 mg/ml血红素。
保存缓冲液:
50 mM Tris-HCl(pH 8.0)
5 mM 氯化钙
50%(v/v)甘油
备注:
1 蛋白酶K的工作浓度为0.05-1 mg/ml。0.2%SDS或1-4 M尿素可刺激该酶的活性。
2 Ca2+可以保护蛋白酶K不会自我降解、增加蛋白酶K的热稳定性、调节蛋白酶K的底物结合位点。
3 在宽pH值(4.0-12.5)范围内保持稳定,pH值范围是7.5-8.0。